福建醫(yī)科大學:開辟非小細胞肺癌治療新途徑
4月23日,福建醫(yī)科大學研究團隊在期刊《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》上發(fā)表了題為“Tumor-suppressive miR-4732-3p is sorted into fucosylated exosome by hnRNPK to avoid the inhibition of lung cancer progression”的研究論文,本研究為非小細胞肺癌提供了一個有前景的生物標志物,并通過靶向hnRNPK阻止miR-4732-3p從非小細胞肺癌細胞中“外泌體逃逸”,為非小細胞肺癌治療開辟了一條新的途徑。
研究背景
肺癌是常見的惡性腫瘤之一,已成為全球癌癥相關死亡的首要原因,其中非小細胞肺癌(NSCLC)約占所有肺癌病例的82%,包括腺癌(LUAD)、鱗狀細胞癌(LUSC)和大細胞癌等亞型。TNMⅰ期NSCLC患者的5年生存率高達65%,而TNMⅳ期患者的5年生存率僅為5%。因此,尋找診斷NSCLC的生物標志物和闡明NSCLC進展的機制對改善患者預后至關重要。
外泌體是一種直徑為40 ~ 160 nm的特殊類型的細胞外囊泡,含有脂質雙層結構。各種類型的細胞分泌的外泌體具有不同的“貨物”以獲得物質交換和細胞通訊,其中MIRNA在腫瘤來源的外泌體中含量豐富,參與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。腫瘤來源的外泌體MIRNA可被癌細胞釋放到血清中,為NSCLC的診斷提供了潛在的非侵入性生物標志物,也為NSCLC的治療提供了有前景的分子靶點。
既往研究發(fā)現,腫瘤細胞來源的外泌體中存在某些與腫瘤相關的糖鏈異常表達,是腫瘤惡性轉化的關鍵標志。巖藻糖基化是常見的糖基化修飾之一,與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。
研究進展
為了揭示miR-4732-3p在NSCLC細胞中的作用,研究人員采用qRT-PCR方法評估其在SK-MES-1、A549、H460、H226和H1299等幾種NSCLC細胞系中的表達。研究人員發(fā)現H460和H1299分別表達了較低和較高的miR-4732-3p。為了確定miR-4732-3p對NSCLC細胞行為的影響,研究人員用miR-4732-3p模擬物轉染H460細胞使其過表達,而用miR-4732-3p抑制劑轉染H1299細胞使其下調。
集落形成和CCK8檢測的結果強調了miR-4732-3p在抑制NSCLC細胞增殖中的關鍵作用。研究人員還進行了鬼筆環(huán)肽染色和侵襲實驗,以確定miR-4732-3p對NSCLC細胞遷移和侵襲能力的影響。鬼筆環(huán)肽染色實驗顯示,過表達miR-4732-3p的NSCLC細胞變得更圓、更小,而敲低miR-4732-3p的NSCLC細胞表現出明顯的形態(tài)學變化和更多的絲狀足,這已被證明是腫瘤侵襲的關鍵。侵襲實驗結果顯示,miR-4732-3p過表達導致遷移和侵襲性H460細胞數量減少,而miR-4732-3p過表達導致遷移和侵襲性H460細胞數量減少,而miR-4732-3p過表達導致遷移和侵襲性H460細胞數量減少。
為了闡明miR-4732-3p抑制NSCLC細胞增殖的潛在機制,研究人員用miR-4732-3p模擬物和miR-NC對H460細胞進行轉錄組測序,并確定差異表達基因(DEGs)進行后續(xù)的基因本體(GO)分析。
為了評估m(xù)iR-4732-3p在體內的潛在作用,研究人員建立了一個異種移植模型,通過向裸鼠注射穩(wěn)定過表達miR-4732-3p和miR-NC的H460細胞。研究結果表明,miR-4732-3p顯著阻礙了腫瘤生長,證據包括腫瘤重量的顯著下降、腫瘤生長速率的降低以及腫瘤內Ki-67表達的降低。與假設一致,對異種移植瘤的蛋白印跡分析進一步證實了穩(wěn)定過表達miR-4732-3p對G2/M期相關蛋白表達的抑制作用。綜上所述,這些結果表明,miR-4732-3p通過誘導體外和體內的G2/M期阻滯抑制了NSCLC進展。
MIR-4732-3P在體外和體內抑制NSCLC增殖
研究結論
總之,這些發(fā)現揭示了miR-4732-3p在NSCLC進展中發(fā)揮著重要作用。本研究還為非小細胞肺癌提供了一個有前景的生物標志物,并通過靶向hnRNPK阻止miR-4732-3p從非小細胞肺癌細胞中“外泌體逃逸”,為非小細胞肺癌治療開辟了一條新的途徑。
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